polyplus-transfection JETPEI-巨噬细胞转染说明书
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| 试剂 | JETPEI ® -巨噬细胞 |
|---|---|
| 分子交付 | 脱氧核糖核酸 |
| 应用 | 原代巨噬细胞、神经胶质和树突细胞的 DNA 转染 |
| 细胞类型 | 原代巨噬细胞、胶质细胞和树突细胞 |
| 转染次数 | 0.5 ml jetPEI ® -巨噬细胞转染试剂足以在 24 孔板中进行多达 500 次转染或在 60 毫米培养皿中进行 160 次转染 |
| 贮存 | 5°C ± 3°C，长达 12 个月 |
| 提供 | 150 毫米氯化钠 |
jetPEI®-巨噬细胞转染被认为难以转染的原代巨噬细胞、神经胶质和树突细胞。它含有甘露糖偶联的线性聚乙烯亚胺，可与表达甘露糖特异性膜受体的细胞（如巨噬细胞）结合。
jetPEI®-Macrophage 也是转染细胞系（如 RAW 264.7）的试剂。
jetPEI®-Macrophage 是一种含甘露糖的线性聚乙烯亚胺，旨在增强在细胞膜上表达甘露糖受体的细胞的转染。细胞靶向是甘露糖残基与特定细胞表面受体结合导致 DNA 复合物内化的结果。
| 参考编号 | 试剂量 | 氯化钠的量 |
|---|---|---|
| 103-05N | 0.5 毫升 | 50毫升 |
JETPEI ® -巨噬细胞使巨噬细胞的转染成功从熟化7天在GM-CSF（图1）的存在的单核细胞衍生的。
图 1：用jetPEI ® -巨噬细胞转染人类巨噬细胞。使用jetPEI ® -巨噬细胞转染后表达β-半乳糖苷酶的人巨噬细胞。
当用jetPEI ® -巨噬细胞转染时，原代人类巨噬细胞和鼠 RAW 264.7 细胞表达显着更高的蛋白质水平（图 2）。
图 2：jetPEI ® -Macrophage 与 jetPEI ®在 24 孔板中对原代人巨噬细胞和鼠 RAW 264.7 细胞的效率比较。在存在 100 U/ml GM-CSF 和 10% 血清的情况下，使用 1 µg pCMVLuc 和 2 µl 转染试剂转染原代人巨噬细胞。使用 2 µg pCMVLuc 和 6.4 µl 转染试剂转染鼠 RAW 264.7 细胞。转染后24小时测量荧光素酶活性。
所述JETPEI ®细胞-巨噬协议是那么简单，JETPEI ®之一：混合与试剂反应以形成复合物，并简单地将混合物加入到细胞中的DNA。JETPEI ® -巨噬细胞是与血清和抗生素兼容，因此消除了对媒体改变的需要。在转染后 24 小时至 72 小时确定蛋白质表达。
JETPEI ® -巨噬细胞非常适合于质粒递送（DNA，shRNA或miRNA的），以表达细胞特异性甘露糖的膜受体，如原发性巨噬细胞，神经胶质和树突状细胞。
每一批jetPEI ® -巨噬细胞都在转染试验中进行测试。通常，在CMV启动子控制下的萤火虫荧光素酶基因的转染产生10 9 RLU（相对光单位）/mg蛋白质。每个批次的值都在分析证书上注明。
