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    AssayQuant:以荧光团技术,赋能高通量筛选与机制研究

     更新时间:2025-04-16 点击量:354

    AssayQuant:以荧光团技术,赋能高通量筛选与机制研究

    AssayQuant Technologies专注于开发激酶和磷酸酶的荧光检测技术,致力于为生物医药研发提供高效、精准的解决方案。公司以PhosphoSens技术为核心,通过实时监测酶活性反应曲线,突破传统终点法的局限性,帮助科研人员更深入地理解抑制剂作用机制。

    AssayQuant的产品线覆盖400余种激酶和磷酸酶检测试剂盒,以及超30,000种荧光多肽底物,支持从基础研究到药物开发的全流程应用。其技术已在全球范围内被132篇文献引用,并与多家国际药企及研究机构建立合作。

    作为中国市场的战略布局,AssayQuant自2022年起授权上海起发实验试剂有限公司为全国一级代理商,提供本地化技术支持与服务。


    核心优势

    1.PhosphoSens技术

    SOX荧光团:尺寸?。ㄓ肷彼嵯嗟保?、疏水性低,可直接标记底物多肽,实现连续荧光信号输出,避免化合物自身荧光干扰。

    动态监测:每30秒至2分钟采集数据,实时捕捉酶活性变化,支持动力学参数(如IC50、Ki、kon/koff)计算。

    2.高特异性与生理相关性

    底物基于天然激酶底物序列优化,确保实验结果与体内环境高度一致,生化实验与体内研究相关性优异。

    3.多功能检测模式

    连续荧光检测:兼容常规荧光酶标仪,无需额外设备。

    时间分辨荧光(TRF):使用Eu3?替代Mg2?,通过红移信号(620nm)消除背景干扰,适用于高灵敏度终点检测。

    4.灵活应用场景

    支持抑制剂效能评估、激酶组分析、高通量筛?。℉TS)、脱靶效应研究等,覆盖肿瘤、免疫、代谢疾病等领域。


    主要产品、技术介绍:

    1.ALK [C1156Y](PhosphoSens Substrate: AQT0101)

    AssayQuant:以荧光团技术,赋能高通量筛选与机制研究

    AssayQuant 的 PhosphoSens 连续检测技术 采用简单的 “添加-读取"操作流程,支持实时动力学监测,仅需通过荧光强度(FI)测量即可完成。

    该技术通过测量反应初始阶段(通常为前30-60分钟)的初始线性区域斜率,提供高精度和高准确性的 初始反应速率 数据,并以每30秒至2分钟的频率采集大量数据点。

    连续检测格式 还可通过以下方式校正化合物自荧光干扰:

    背景信号(包含化合物及反应体系中除酶外的所有组分)的荧光信号在反应过程中恒定不变;

    通过从总荧光信号(包含酶及所有反应组分)中减去背景信号,即可计算每个时间点的 净信号。

    该技术兼容几乎所有具备 动力学读板功能 的商用荧光酶标仪及实验室自动化设备,无需终止反应或显色步骤,显著缩短实验时间并提升通量。


    2.ABL1(PhosphoSens Substrate: AQT0030)

    AssayQuant:以荧光团技术,赋能高通量筛选与机制研究

    由于许多化合物库含有自荧光化合物,AssayQuant 推出了 PhosphoSens Red 检测试剂盒,该试剂盒允许在更长波长(>600 nm)下进行检测,同时保持相同的激发波长最大值,并采用 时间分辨荧光(TRF) 技术。

    我们建议在激发光与发射波长检测之间设置 100 微秒延迟,并采用 300 微秒采集时间,以避免反应混合物中荧光材料(具有纳秒级短寿命)的信号干扰。

    反应完成后,向每个孔中加入基于 铕离子(Eu3+) 的试剂,该试剂会置换螯合复合物中的 Mg2+。Soc 荧光团被激发后,通过敏化作用增强铕的发光,产生最大波长为 615 nm(红色) 的光信号,可通过标准滤光片进行测量。


    3.CDC42BPG(PhosphoSens Substrate: AQT0837)


    AssayQuant:以荧光团技术,赋能高通量筛选与机制研究

    由于许多化合物库含有自荧光化合物,AssayQuant开发了PhosphoSens Red检测技术,该技术允许在更长波长(>600 nm)下进行检测,同时保持相同的激发波长最大值,并采用时间分辨荧光(TRF)技术。

    我们建议在激发光与发射波长检测之间设置100微秒延迟,并采用300微秒采集时间,以避免反应混合物中荧光材料(具有纳秒级短寿命)的信号污染。

    反应完成后,向每个孔中加入基于铕离子(Eu3?)的试剂,该试剂会置换螯合复合物中的镁离子(Mg2?)。Sox荧光团的激发会敏化铕离子的发光,产生最大波长为615 nm(红色)的光信号,可通过标准滤光片进行测量。


    目标客户群体

    生物医药企业:小分子激酶抑制剂研发、临床前药效评价。

    科研机构:癌症、免疫疾病等领域的酶学机制研究。

    CRO/CDMO:高通量筛选、化合物库活性评估。

    诊断试剂开发:基于激酶活性的检测方法学建立。


    常见问题与解答

    Q1:PhosphoSens技术与传统终点法相比有何优势?

    A:传统终点法仅能获取单一时间点数据,而PhosphoSens通过连续监测反应曲线,可精准计算动力学参数(如IC50、Ki),并区分可逆/不可逆抑制剂。

    Q2:SOX荧光团是否兼容常规荧光酶标仪?

    A:是的。SOX在485nm激发/485nm发射模式下,与主流酶标仪(如FlexStation 3、SpectraMax)兼容。

    Q3:如何解决化合物自身荧光干扰问题?

    A:使用PhosphoSens-Red试剂盒(含Eu3?),通过时间分辨荧光(延迟100秒读取620nm信号)有效规避干扰。

    Q4:是否支持高通量筛?。℉TS)?

    A:支持。PhosphoSens试剂盒设计适配96孔板,可集成至自动化液体处理系统,单板通量达384孔。

    Q5:能否定制特殊突变体底物?

    A:可以。AssayQuant提供定制化多肽合成服务,覆盖野生型及常见突变体(如EGFR T790M、ALK C1156Y)。

    Q6:样品处理对检测结果影响大吗?

    A:建议使用低浓度ATP(1-2 mM)模拟生理条件,并避免反复冻融。具体方案可参考产品说明书或联系技术支持。

    Q7:试剂盒的有效期和储存条件?

    A:多数试剂盒有效期为12个月,需避光储存于-20℃。冻干粉需复溶后48小时内使用。

    Q8:如何验证抑制剂的可逆性?

    A:采用“跳跃稀释法":在高浓度抑制剂(>IC50 25倍)中孵育酶后稀释,可逆抑制剂活性恢复,不可逆抑制剂活性维持低位。

    Q9:是否提供技术培训与文献支持?

    A:是的。AssayQuant提供线上/线下操作培训,并可分享同类靶点的成功案例及文献数据。

    Q10:支持哪些物种的激酶检测?

    A:目前主要覆盖人类激酶组,部分试剂盒兼容小鼠、大鼠等模式生物,定制服务可扩展至其他物种。


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    货号

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    1X Kinase Dilution Buffer, No DTT, No EGTA, 1 x 20 mL

    ea

    AssayQuant

    CSKS-AQT0001

    PhosphoSensKit

    1mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0032B

    BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0032, 1 mg net peptide, lyophilized

    1mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0101

    PhosphoSens Kit

    1mg

    AssayQuant

    CSKSAQT0101B

    BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, Peptide Substrate, 1mg net peptide, lyophilized (Lot 011-02V1)

    1mg

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    CSKS-AQT0101B

    PEPTIDE SUBSTRATE

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    CSKS-AQT0101B- 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

    BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

    ea

    AssayQuant

    CSKS-AQT0101K

    Cysteine Sox Kinase Sensor AqT0101

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    AssayQuant

    CSKS-AQT0104B

    PEPTIDE SUBSTRATE

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    CSKS-AQT0157B

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    PEPTIDE SUBSTRATE

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    CSKS-AQT0231

    Ser/Thr Kinase Peptide substrate

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    CSKS-AQT0231B

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    1mg

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    CSKS-AQT0231k

    Ser/Thr Kinase Assay KIT PRKACG (PKACG, PKACg); ROCK1; ROCK2; RPS6KB1 (p70S6K); RPS6KB2(P70S6KB)

    96t

    AssayQuant

    CSKS-AQT0235B

    DDR2 peptide

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    Peptide substrate

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    CSKS-AQT0505K

    KIT-Cysteine Sox Kinase Sensor

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    AssayQuant

    CSKS-AQT0515

    Cysteine Sox Kinase Sensor

    1mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0535

    Ser/Thr Kinase Peptide substrate

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    CSKS-AQT0536B

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    CSKS-AQT0537B

    PhosphoSens substrate

    1mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0653B

    Bulk Sensor Peptide (PN:CSKS-AQT0653B)

    1 mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0653KR

    Red-Shift Evaluation Kits (PN:CSKS-AQT0653KR)

    Kits

    AssayQuant

    CSKS-AQT0663B

    Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0663, 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

    1mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0663K

    KIT - Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0663, 96 assays, liquid

    kit

    AssayQuant

    CSKS-AQT0688B

    Peptide substrate

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    CSKS-AQT0691B

    Peptide substrate

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    AssayQuant

    CSKS-AQT0693B

    PhosphoSens Kinase Sensor Peptide

    1mg

    AssayQuant

    CSKS-AQT0730

    Ser/Thr Kinase Peptide substrate

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    AssayQuant

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    PEPTIDE SUBSTRATE

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    CSKS-AQT0733B

    PEPTIDE SUBSTRATE

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    CSKS-AQT0734

    BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0734 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized

    1mg

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    CSPS-AQT0737B

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    1mg

    AssayQuant

    Sample

    Ammonium bicarb solution for peptide solubilization

    1.0 mL

    AssayQuant

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